RealMOD™ Probe W² 2x qRT-PCR mix
PRODUCT INFORMATION
Description
TaqMan Probe type으로 구성되어 있으며, quantitative PCR전용 One-step RT-PCR 제품
- • RNA를 template로 한 튜브 내에서 cDNA 합성과 Real-time PCR을 한 번에 진행하는 제품
- • RNA/DNA hybrid를 분해하는 RNase H활성이 없어 한층 더 뛰어난 활성을 보유한 제품
- • Hot-start DNA polymerase의 높은 특이성이 One-step RT-PCR에도 적용
- • Quantitative RT-PCR 실험에 높은 재현성과 사용 편의성을 갖춘 제품
RealMOD™ Probe W² 2x qRT-PCR mix는 RNA를 이용하여 One-step으로 qRT-PCR을 할 수 있는 제품입니다. 제품에 포함된 RT-PCR Enzyme들은 RNA로부터 cDNA를 합성하는 reverse transcription 반응을 담당하는 RTase로 MMLV RH(-) RTase 가 있으며, 합성된 cDNA를 다량 증폭하는 PCR 반응을 전담하는 DNA polymerase로는 Hot-start DNA polymerase가 최적의 활성을 나타내는 조성으로 혼합되어 있습니다.
본 제품은 2x type으로 제공되고 있으며, One-step qRT-PCR 반응에 필요한 reaction buffer, dNTP, Mg²+등이 최적 비율로 조합되어 있어 사용자들의 재현성 있는 결과분석이 가능한 제품입니다. 다양한 Real-time PCR 장비에 모두 호환되는 제품으로 각 장비에 알맞은 용량에 맞추어 사용이 가능합니다.
Applications
- 01Gene expression profiling
- 02Quantitative RT-PCR assay
- 03RNA virus research
Kit Contents
| Content |
100 rxn. |
| RealMOD™ Probe W² 2x qRT-PCR mix |
1 ml |
| Manual |
1 ea |
Wide Instruments Compatibility
RealMOD™ Probe W² 2x qRT-PCR mix는 standard qPCR이 가능하도록 되어 있습니다. 본 제품을 이용하여 실험 가능한 기기의 종류는 아래와 같습니다.
- • Applied BioSystems : QuantStudio™ 12K Flex, ViiA™ 7, 7900HT, 7500, 7700, StepOne™ & StepOnePlus™
- • Stratagene : MX3000P™, MX3005P™
- • Bio-Rad : CFX96™ & CFX384™, iQ™5 & MyiQ™, Chromo4™, Opticon
E=mc®2 & MiniOpicon®
- • Qiagen : Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 6000
- • Eppendorf : Mastercycler® ep realplex2 & ep realplex4
- • Illumina : The Eco™
- • Roche : LightCycler®480
Technical Data
RealMOD™ Probe W² 2x qRT-PCR mix를 이용한 성능 비교실험결과
- 동일한 sample을 사용하여 각각의 kit에서 실험을 진행한 결과, 두 제품 모두 dilution factor(1/10)에 적합한 Ct값이 관찰되었습니다.
- 같은 종류 및 농도의 sample을 사용했음에도 불구하고, 본 제품의 실험결과 그래프에서 Ct값이 조금 더 앞쪽에서 관찰됨을 확인하였습니다.
- 타사 제품과 비교하여, 동등 수준 이상의 성능이 나타남.
TroubleShooting Guide
- Q실험결과, NC (negative control)에서 signal이 검출되었습니다.
- A외부로부터 오염이 됐을 가능성이 있습니다. Mixture 제작 시 오염에 유의하시기 바랍니다.
- QNon specific amplification 현상이 일어납니다.
- A여러 가지 원인 중 먼저 annealing 온도를 올려보실 것을 권장합니다. 또는 primer의 디자인이 잘못 되어 amplify가 잘 일어나지 않았을 수
있으므로 primer의 디자인을 다시 해보시기 바랍니다. 또한 Probe를 넣으셨는지도 꼭 확인하시기 바랍니다.
- A2Sample을 준비하는 과정에서 RNase 오염 가능성이 있으므로, RNA 실험을 위해서 모든 실험 기자재
Glasswear, tips 등)를 auto-clave 후, 주의하여 실험을 진행해 주시기 바랍니다.
- Q실험결과, PCR product가 없거나 product signal이 약합니다. 어떻게 해야 하나요?
- A이 문제에 대한 원인은 여러 가지가 있을 수 있습니다. 첫 번째로 PCR product size가 길어 완벽한 PCR실험이 되지 않을 경우입니다.
이때는 PCR product의 크기를 줄여보십시오. 100 – 150bp 정도가 적합하며 최대 60 – 300bp를 벗어나면 실험에 영향을 줄 수 있습니다. 또한 annealing 온도가 영향을 줄 수 있는데, 가장 적합한 온도를 찾는 것이 중요합니다. 그 외 해결방법은 본 제품의 매뉴얼의 trouble shooting guide를 확인하시기 바랍니다.
- A2여러 가지 원인 중 먼저 RNA template의 양을 증가시켜 보실 것을 권장합니다. 또한 template속 contaminant(EDTA/guanidinium/protein 등)들을 완전한 제거 할 수 있도록 샘플을 준비하시기 바랍니다.
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