Protein

PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution

Cat.No 용량 주문수량 판매가
21011 100 ㎖ up down 135,000원
PRODUCT INFORMATION
Description

Bradford assay 법을 기반으로 하여 10 ~ 200 ng/ml의 단백질을 간편하고 빠르게 정량 가능한 제품

  • • Background interference가 작음
  • • 10 ~ 200 ng/ml 단백질 정량 최적화
  • • 소요시간이 10분 이내로 매우 간편하게 사용 가능

단백질 관련 연구를 하는 데 있어서 단백질 정량은 매우 중요한 단계 중의 하나입니다. 이와 같이 단백질 정량에 사용되는 측정법으로는 특별한 시약이나 조작 없이
280nm에서의 흡광도를 측정하여 정량 하는 방법과 단백질과 결합하여 특정 스펙트럼 파장의 변화를 일으키는 reagent의 흡광도로 정량 하는 방법이 있습니다.

280nm에서의 흡광도를 측정하는 정량은 간편하다는 특성이 있는 반면에 phenylalanine, tryptophan이나 tyrosine 등의 아미노산이 없는 경우에는 단백질 검출이
불가능하고 DNA에 의해 absorbance interference(AI)가 일어나기 때문에 흔히 사용되고 있지 않습니다.
이외 reagent를 이용한 방법으로 Biuret assay, Lowry assay, BCA assay, Bradford assay 등이 있는데 이 중 Biuret assay, Lowry assay, BCA assay 방법은
단백질 정량에 있어서 민감도가 우수한 편이지만 사용이 불편하고 시간이 오래 걸린다는 단점이 있습니다.

반면 가장 흔히 사용되고 있는 단백질 정량법인 Bradford assay는 소요시간이 매우 짧고(10분 내), 사용법 또한 간편하여 보편적으로 사용되고 있습니다.
Bradford assay에 주로 사용되는 Coomassie Brilliant Blue G-250은 산성 용액 단백질의 positive charge를 띤 부분 (basic amino acid인 arginine, lysine, histidine 잔기)에 결합하여 흡광도가 465nm에서 595nm로 이동합니다. (그림 1. 참조)
광범위한 단백질 농도를 가지는 시료에 대한 이 정색반응은 상대적으로 비례 관계를 가지며 595nm의 흡광도를 측정해 standard curve와 비교 함으로써 시료 중의
단백질 농도를 단시간에 간단하게 결정할 수 있습니다.

PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution은 Bradford assay 방법을 보다 간편하게 사용할 수 있도록 하였습니다.
PRO-MEASURE Solution 1 volume과 증류수 9 volume을 첨가하여 반응 시약을 제작하였을 뿐만 아니라, 초순도 제품으로 용액 자체의 AI를 줄여
background absorbance가 작게 나타나도록 조절하였습니다. 또한 측정용액 자체가 SDS, EDTA 등에 의해 발색이 되어 정확한 수치 측정이 어려운 타사 제품 대비
당사의 제품은 이에 대한 반응을 최소화하도록 개발함으로써 측정의 오차를 줄일 수 있습니다.

그림 1. Bradford assay 원리

Applications
  • 01Protein Purification
  • 02SDS PAGE
  • 03Western blot assay, etc.
Kit Contents
Content Size
PRO-MEASURE™ solution(10x) 100ml × 1 ea
Standard solution(BSA, 1 mg/ml) 1ml × 1 ea
Manual 1 ea
Technical Data

BSA 농도를 이용한 standard curve 작성

PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution을 이용하여 제품에서 제공되는 BSA의 농도별로 희석한 후 흡광도 595nm로 측정하여
standard curve를 작성하였습니다.

Calculate standard curve through OD595 and concentration of BSA.

TroubleShooting Guide
QB사의 Bradford 시약을 사용하고 있었는데 감도가 떨어져 다른 시약으로 변경하고자 합니다.
인트론에도 Bradford 방법을 이용한 단백질 정량 시약이 있나요?
A당사의 PRO-MEASURE 제품을 추천 드립니다. Bradford assay 방법을 보다 간편하게 사용할 수 있도록 하였으며, 초순도 제품으로 용액
자체의 AI를 줄여 background absorbance가 작게 나타나도록 조절하였습니다.
더불어, 타 외국사의 제품은 측정용액 자체가 SDS, EDTA 등에 의해 발색이 되기 때문에 정확한 수치를 측정하기가 어려운 반면, 당사의 제품은 이에 대한 반응을 최소화하도록 개발함으로써 측정의 오차를 줄일 수 있습니다.
QB사의 Bradford 시약을 사용하다가 지인을 통해 PRO-MEASURE를 소개받았습니다. 그런데 B사는 1L를 제공하는데 PRO-MEASURE는 용량이 100ml으로 알고 있습니다. 실제 단백질 assay양이 얼마나 되나요?
A당사 제품에 관심을 가져 주셔서 감사합니다. PRO-MEASURE Solution은 10X solution으로 제공되고 있기 때문에 실제 assay 가능한 양은 1L입니다. 사용 전에 PRO-MEASURE Solution 1volume과 증류수 9volume을 첨가하여 1X solution으로 제작한 후 사용하시기 바랍니다.
Q인트론 제품을 사용하여 Standard curve를 작성하였는데, 매번 다른 다른 결과 값이 나옵니다. 실험상 오류인가요?
A매번 다른 standard curve를 얻으시는 것은 Bradford 기반의 단백질정량 실험의 한계입니다. 때문에 제공되는 메뉴얼 상의 값 또한 절대값이 아닙니다. 최대한 오차를 줄이기 위해서는 Standard curve 작성시 BSA 희석 범위를 좁히어 실험 진행을 한다면 보다 신뢰성 있는 값을 구할 수 있습니다. 또한 표준검량곡선을 작성할 때는 최소 Triplication 하는 것이 좋고, 보다 정확한 실험을 수행하시길 원한다면 SMART BCA Kit 사용이 더욱 유리합니다.
QPRO-MEASURE의 단백질 정량 측정 범위가 어떻게 됩니까?
A당사의 PRO-MEASURE 제품은 일반적인 단백질 정량법인 Bradford method를 사용하고 있습니다.
이에 실험 소요시간이 10분 이내로 짧고, 10-25ug/㎕ 정도의 극소량 단백질도 검출할 수 있습니다.
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