Description

Bradford assay 법을 기반으로 하여 10 ~ 200 ng/ml의 단백질을 간편하고 빠르게 정량 가능한 제품

• • Background interference가 작음
• • 10 ~ 200 ng/ml 단백질 정량 최적화
• • 소요시간이 10분 이내로 매우 간편하게 사용 가능

단백질 관련 연구를 하는 데 있어서 단백질 정량은 매우 중요한 단계 중의 하나입니다. 이와 같이 단백질 정량에 사용되는 측정법으로는 특별한 시약이나 조작 없이
280nm에서의 흡광도를 측정하여 정량 하는 방법과 단백질과 결합하여 특정 스펙트럼 파장의 변화를 일으키는 reagent의 흡광도로 정량 하는 방법이 있습니다.

280nm에서의 흡광도를 측정하는 정량은 간편하다는 특성이 있는 반면에 phenylalanine, tryptophan이나 tyrosine 등의 아미노산이 없는 경우에는 단백질 검출이
불가능하고 DNA에 의해 absorbance interference(AI)가 일어나기 때문에 흔히 사용되고 있지 않습니다.
이외 reagent를 이용한 방법으로 Biuret assay, Lowry assay, BCA assay, Bradford assay 등이 있는데 이 중 Biuret assay, Lowry assay, BCA assay 방법은
단백질 정량에 있어서 민감도가 우수한 편이지만 사용이 불편하고 시간이 오래 걸린다는 단점이 있습니다.

반면 가장 흔히 사용되고 있는 단백질 정량법인 Bradford assay는 소요시간이 매우 짧고(10분 내), 사용법 또한 간편하여 보편적으로 사용되고 있습니다.
Bradford assay에 주로 사용되는 Coomassie Brilliant Blue G-250은 산성 용액 단백질의 positive charge를 띤 부분 (basic amino acid인 arginine, lysine, histidine 잔기)에 결합하여 흡광도가 465nm에서 595nm로 이동합니다. (그림 1. 참조)
광범위한 단백질 농도를 가지는 시료에 대한 이 정색반응은 상대적으로 비례 관계를 가지며 595nm의 흡광도를 측정해 standard curve와 비교 함으로써 시료 중의
단백질 농도를 단시간에 간단하게 결정할 수 있습니다.

PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution은 Bradford assay 방법을 보다 간편하게 사용할 수 있도록 하였습니다.
PRO-MEASURE Solution 1 volume과 증류수 9 volume을 첨가하여 반응 시약을 제작하였을 뿐만 아니라, 초순도 제품으로 용액 자체의 AI를 줄여
background absorbance가 작게 나타나도록 조절하였습니다. 또한 측정용액 자체가 SDS, EDTA 등에 의해 발색이 되어 정확한 수치 측정이 어려운 타사 제품 대비
당사의 제품은 이에 대한 반응을 최소화하도록 개발함으로써 측정의 오차를 줄일 수 있습니다.

Applications

• 01Protein Purification
• 02SDS PAGE
• 03Western blot assay, etc.

Kit Contents

Technical Data

PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution을 이용하여 제품에서 제공되는 BSA의 농도별로 희석한 후 흡광도 595nm로 측정하여
standard curve를 작성하였습니다.

Calculate standard curve through OD595 and concentration of BSA.