Description

세포나 조직으로부터 빠르고 간편하게 고순도의 total protein을 추출 할 수 있는 제품

• • 세포나 조직으로부터 추가 조작 없이 단백질 추출 가능
• • Ionic detergent를 사용하여 단백질을 monomeric form 형성
   - Western blot analysis 등의 실험 시 단백질 분리에 유용
   - 단백질 분자량 측정에 유용
• • 단백질 측정 시 absorbance hindrance가 없어 단백질 농도 측정 시 오차가 없음
• • Protein stabilization buffer를 이용하여 단백질 안정화
• • 5가지 Protease inhibitor를 첨가되어 있어 protein degradation을 최소화
• • 단백질 추출시간이 20~30분 이내로 짧아 시간 절약

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution은 각종 세포나 조직으로부터 단백질을 간편하고 빠르게 추출할 수 있도록 고안된 제품입니다.

일반적으로 단백질을 추출할 때 사용되는 detergent는 amphiphilic molecules로 hydrophobic tail 부분과 hydrophilic head 부분으로 구성되어 있고, 두 부분이
서로 결합하여 micelle을 형성합니다.
Solubilized protein은 lipid-detergent mixed micelle을 형성하고, trans-membrane protein은 protein-lipid-detergent complex를 형성하게 되는데 이렇게 micelle을 형성하는 정도를 CMC(critical micelle concentration)라 합니다. 이것은 고효율 및 고순도의 단백질 정제에 중요한 역할을 하며 pH, 온도, ionic strength, multivalent ions of organic solvents, 및 detergent 순도 등에 의해 좌우됩니다. 그리고 특성에 따라 detergent는 ionic detergent, non-ionic detergent, zwitterionic detergent로 나눌 수 있습니다.

Ionic detergent는 SDS, LiDS, DOC 등과 같은 cationic 및 anionic detergent로 다시 나누어 이들은 highly denaturant로 monomeric protein으로 단백질을
분리시키는 특성이 있어 Western blot analysis 및 분자량 측정 등에 주로 이용합니다.
Triton X-100과 같은 non-ionic detergent는 less protein denaturant이기 때문에 protein-protein interaction 등에 주로 이용되고, CHAPS 등과 같은 zwitterionic detergent는 head 부분에 negative 및 positive charge를 동시에 갖고 있어 non-ionic detergent보다 protein-protein interaction에 효율적이며
ionic detergent보다 protein denaturation 정도가 적습니다. 이처럼 단백질을 추출할 때 적절한 buffer 및 detergent를 선택하여 사용해야 합니다.

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution은 위와 같은 detergent 중 Ionic detergent를 함유하고 있어 monomeric protein으로 단백질을 분리시키는 특성으로
Western blot analysis 및 분자량 측정에 매우 유용하게 사용할 수 있는 특징을 가지고 있습니다.
이와 더불어 5종류의 protease inhibitor(표 1. 참조)가 함유되어 있어 높은 순도의 단백질을 추출할 수 있으며 Protein stabilization buffer를 이용하여
protease inhibitor의 활성과 같이 유지되기 유지되기 때문에 단백질 추출 후 장시간 보관에도 단백질의 분해가 없을 뿐만 아니라 냉동 보관 시 얼지 않아
동결/해동에 의한 단백질 분해가 없습니다.

이처럼 PRO-PREP™ Protein Extraction Solution은 세포나 조직에 PRO-PREP™ Solution을 첨가 후, 10분~20분 정도의 incubation으로 단백질을 추출할 수 있는 매우 간편한 제품입니다.

Applications

• 01Western blot assay
• 02Protein-protein interaction
• 03Immunoprecipitation, etc.

Kit Contents

Technical Data

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution을 이용하여 total Protein을 추출한 후 15% SDS-PAGE gel에 전기영동 하여 coomassie brilliant blue dye를 사용하여 염색한 결과입니다.

Lane M, GangNam-STAIN Marker; lane 1, K562; lane 2, SNU-1; lane 3, SNU5; lane4, B16; lane 5, rat Heart; lane 6, cow muscle; lane 7, cow subcutaneous fat

다양한 세포나 조직으로부터 PRO-PREP™ Protein Extraction Solution을 이용하여 단백질을 분리한 후 PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution으로 total protein양을 측정한 결과 5x106 세포의 경우 평균 2mg, 10mg의 조직의 경우 평균 8~9mg의 단백질 추출량을 볼 수 있습니다.