Protein

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution (C/T)

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17081 100 ㎖ up down 130,000원
PRODUCT INFORMATION
Description

세포나 조직으로부터 빠르고 간편하게 고순도의 total protein을 추출 할 수 있는 제품

  • • 세포나 조직으로부터 추가 조작 없이 단백질 추출 가능
  • • Ionic detergent를 사용하여 단백질을 monomeric form 형성
  •    - Western blot analysis 등의 실험 시 단백질 분리에 유용
       - 단백질 분자량 측정에 유용
  • • 단백질 측정 시 absorbance hindrance가 없어 단백질 농도 측정 시 오차가 없음
  • • Protein stabilization buffer를 이용하여 단백질 안정화
  • • 5가지 Protease inhibitor를 첨가되어 있어 protein degradation을 최소화
  • • 단백질 추출시간이 20~30분 이내로 짧아 시간 절약

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution은 각종 세포나 조직으로부터 단백질을 간편하고 빠르게 추출할 수 있도록 고안된 제품입니다.

일반적으로 단백질을 추출할 때 사용되는 detergent는 amphiphilic molecules로 hydrophobic tail 부분과 hydrophilic head 부분으로 구성되어 있고, 두 부분이
서로 결합하여 micelle을 형성합니다.
Solubilized protein은 lipid-detergent mixed micelle을 형성하고, trans-membrane protein은 protein-lipid-detergent complex를 형성하게 되는데 이렇게 micelle을 형성하는 정도를 CMC(critical micelle concentration)라 합니다. 이것은 고효율 및 고순도의 단백질 정제에 중요한 역할을 하며 pH, 온도, ionic strength, multivalent ions of organic solvents, 및 detergent 순도 등에 의해 좌우됩니다. 그리고 특성에 따라 detergent는 ionic detergent, non-ionic detergent, zwitterionic detergent로 나눌 수 있습니다.

Ionic detergent는 SDS, LiDS, DOC 등과 같은 cationic 및 anionic detergent로 다시 나누어 이들은 highly denaturant로 monomeric protein으로 단백질을
분리시키는 특성이 있어 Western blot analysis 및 분자량 측정 등에 주로 이용합니다.
Triton X-100과 같은 non-ionic detergent는 less protein denaturant이기 때문에 protein-protein interaction 등에 주로 이용되고, CHAPS 등과 같은 zwitterionic detergent는 head 부분에 negative 및 positive charge를 동시에 갖고 있어 non-ionic detergent보다 protein-protein interaction에 효율적이며
ionic detergent보다 protein denaturation 정도가 적습니다. 이처럼 단백질을 추출할 때 적절한 buffer 및 detergent를 선택하여 사용해야 합니다.

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution은 위와 같은 detergent 중 Ionic detergent를 함유하고 있어 monomeric protein으로 단백질을 분리시키는 특성으로
Western blot analysis 및 분자량 측정에 매우 유용하게 사용할 수 있는 특징을 가지고 있습니다.
이와 더불어 5종류의 protease inhibitor(표 1. 참조)가 함유되어 있어 높은 순도의 단백질을 추출할 수 있으며 Protein stabilization buffer를 이용하여
protease inhibitor의 활성과 같이 유지되기 유지되기 때문에 단백질 추출 후 장시간 보관에도 단백질의 분해가 없을 뿐만 아니라 냉동 보관 시 얼지 않아
동결/해동에 의한 단백질 분해가 없습니다.

이처럼 PRO-PREP™ Protein Extraction Solution은 세포나 조직에 PRO-PREP™ Solution을 첨가 후, 10분~20분 정도의 incubation으로 단백질을 추출할 수 있는 매우 간편한 제품입니다.

표 1. Add Protease Inhibitor

Applications
  • 01Western blot assay
  • 02Protein-protein interaction
  • 03Immunoprecipitation, etc.
Kit Contents
Content Size
PRO-PREP™ Protein Extraction Solution 100ml × 1 ea
Technical Data

SDS-PAGE gel Electrophoresis

PRO-PREP™ Protein Extraction Solution을 이용하여 total Protein을 추출한 후 15% SDS-PAGE gel에 전기영동 하여 coomassie brilliant blue dye를 사용하여 염색한 결과입니다.

Lane M, GangNam-STAIN Marker; lane 1, K562; lane 2, SNU-1; lane 3, SNU5; lane4, B16; lane 5, rat Heart; lane 6, cow muscle; lane 7, cow subcutaneous fat

Yield

다양한 세포나 조직으로부터 PRO-PREP™ Protein Extraction Solution을 이용하여 단백질을 분리한 후 PRO-MEASURE™ Protein Measurement Solution으로 total protein양을 측정한 결과 5x106 세포의 경우 평균 2mg, 10mg의 조직의 경우 평균 8~9mg의 단백질 추출량을 볼 수 있습니다.

TroubleShooting Guide
QLysis buffer를 만들어서 사용 중인데 실험량이 늘어나면서 매번 만들어 사용하기 불편합니다.
단백질 추출 제품 중 kit 화 된 제품이 있나요?
A당사의 PRO-PREP을 사용해 보시기 바랍니다. PRO-PREP은 각종 세포나 조직으로부터 단백질을 추출할 수 있는 kit로 20분 이내 단백질을 추출할 수 있습니다. 또한 일반적으로 많이 사용하는 5종류의 protease inhibitor가 함유되어있어 별도의 protease inhibitor를 첨가하지
않으셔도 되고 absorbance hindrance가 없기 때문에 단백질 정량 시 오차가 없습니다.
QRIPA buffer를 사용하다가 영업사원이 PRO-PREP을 추천하여 테스트를 해보았습니다. 그런데 PRO-PREP으로 추출한 샘플이 RIPA buffer로 추출한 것과 달리 끈적임이 있는데 원래 이런 건가요? 혹시 이런 끈적임이 western blot 실험결과에 영향을 주지 않나요?
APRO-PREP은 protein 샘플의 냉/해동 시 degradation을 줄이기 위하여 –20℃에서도 얼지 않도록 glycerol이 첨가되어 있습니다.
때문에 샘플 양이 많아지면 끈적임 현상이 있을 수 있으며 Ionic detergent를 사용하여 단백질을 monomeric form으로 형성케 함으로써 Western blot analysis 등의 실험 시 단백질 분리에 매우 유용합니다.
QMouse liver의 membrane protein 추출하려 합니다. 작은 size의 단백질도 추출 가능한가요?
A당사의 PRO-PREP은 membrane에 있는 small size의 protein은 물론 nucleus, cytosol protein이 모두 추출 가능할 뿐 아니라 각종
세포나 조직으로부터 단백질을 추출할 수 있는 kit로 별도의 과정 없이 30분 만에 단백질 추출이 가능합니다.
Q초파리 발달과정 관련 연구를 수행 중인데 초파리와 같은 곤충에서 단백질 추출 가능한 제품이 있나요? 추출 방법은 어떻게 되나요?
A당사의 PRO-PREP은 각종 세포나 조직으로부터 단백질을 추출할 수 있도록 고안된 제품으로 매우 간편하게 단백질 추출 가능합니다.
초파리를 통째 튜브에 넣고 PRO-PREP 600ul를 첨가하여 homogenize 하시고, 이후 실험은 제공된 프로토콜에 따라 진행하시면 되고
추출된 단백질은 -20℃에서 6개월 이상 보관이 가능합니다.
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