Description

Proofreading 기능을 가지고 있어 작은 size DNA부터 20 Kb 이상의 DNA까지 증폭이 가능한 높은 감도, 정확성 및 낮은 에러율을 가진
2x PCR Master mix type의 제품

• • Ready to Use
     - 반응에 필요한 모든 시약이 tube 하나에 용액상태로 포함
     - Template 및 primer만 첨가하여 바로 PCR 수행
• • PCR reaction volume 조절이 가능
• • 높은 정확성 및 낮은 에러율 가짐
     - Proof-reading 활성이 있어 장편의 DNA template 증폭 가능
     - 긴 template DNA 및 짧은 template DNA의 증폭에 대한 높은 증폭효율 보장
• • 클로닝된 DNA,인체 genomic DNA 뿐만 아니라 GC-rich 또는 looped sequences등의 증폭이 어려운 template에 이르기까지 다양한
     DNA에 적용 가능

2x PCR Master mix Solution(i-MAX™ II)는 i-MAX™ II DNA Polymerase를 포함하여 PCR 반응에 필요한 모든 구성요소들을 하나의 tube안에 2x Master mix type으로 하여 간단하면서도 최상의 결과를 얻을 수 있도록 고안된 제품입니다. 본 제품은 template DNA, Primer set 그리고 D.W만 첨가하여 PCR을 할 수 있고,
Gel loading buffer가 들어가 있어 다른 어떠한 처리 없이 gel loading을 할 수 있습니다.

본 제품에 사용된 i-MAX ™ II DNA Polymerase는 Taq DNA Polymerase와 Pfu DNA Polymerase의 장점을 취하여 각 효소의 단점을 극복하고 새로운 기능을 얻은 효소로서, Proofreading 기능을 가지고 있어 작은 size DNA(4~5 Kb 이하)부터 20 Kb 이상의 DNA까지 증폭이 가능합니다. 각 효소별로 장단점은 다음과 같습니다. Taq DNA Polymerase는 template가 5 Kb를 넘는 경우 증폭효율이 현저히 떨어지며 주형의 종류에 따라 다르기는 하지만 10 Kb나 그 이상의 DNA 주형은 증폭하기 어렵습니다. 이런 현상은 Taq DNA Polymerase에 proof-reading 활성이 없기 때문에 DNA 합성과정에서 mismatched nucleotide가 삽입되는 경우 template에서 떨어져서 중합에 실패하기 때문입니다. Taq DNA Polymerase의 이러한 결함은 교정기능이 있는 내열성 DNA polymerase를 함께 사용함으로써 극복될 수 있습니다. 이러한 교정 기능은, DNA Polymerase가 중합반응을 진행하는 중에 mismatched(상보적이지 않은) nucleotide가 끼어든 경우 이를 제거하고 상보적인 nucleotide로 교정할 수 있다는 것입니다. 이러한 활성은 Taq DNA Polymerase보다 더 정확한 염기서열의 PCR 산물을 얻을 수 있도록 하기도 하지만, Taq DNA Polymerase에
비하여 더 긴 DNA template를 증폭할 수 있도록 해줍니다.

이러한 교정기능이 있는 내열성 DNA Polymerase 중 대표적인 효소가 Pfu DNA Polymerase로 일반적인 Taq으로 증폭이 어려운 긴 size 의 PCR(up to ~ 30 Kb)에 적합한 효소로 일반 Taq DNA Polymerase에 비해 높은 fidelity와 proof reading 기능을 가지고 있습니다. 하지만 Pfu DNA Polymerase는 중합효율이 떨어져 DNA 중합에 더 많은 시간을 필요로 한다는 단점을 가지고 있습니다.

앞서 언급한 바와 같이, 2x PCR Master mix Solution(i-MAX™ II)는 Taq DNA Polymerase와 Pfu DNA Polymerase의 장점을 취한 i-MAX™ II DNA Polymerase를 사용하여 작은 size(4~5Kb 이하) 뿐만 아니라 긴 size에서의 증폭률을 증가시켰음은 물론, 민감도 부분에서도 우수한 결과를 나타내며 이와 더불어 재현성이 높고,
여러 가지 sample에 대해 빠르고 간단하게 실험하실 수 있는 제품입니다.

Kit Contents

Technical Data

2x PCR Master mix Solution(i-MAX™ II)를 타사 동일 기능의 제품과 민감도를 비교 하기 위하여 Human genomic DNA template를 농도별 희석하여 1 Kb DNA fragment PCR을 진행한 결과, 결과에서 볼 수 있듯이 타사 제품 대비 동등 이상의 결과를 확인 할 수 있습니다.

A, Competitor; B, 2x PCR Master mix Solution(i-MAX™ II)
Lane M, 1 Kb DNA Marker; lane NC, Negative control; lane 1, 50 ng gDNA, Lane 2, 25 ng gDNA; lane 3, 12.5 ng gDNA; lane 4, 6.25 ng gDNA; lane 5, 3.125 ng gDNA; lane 6, 1.56 ng gDNA; lane 7, 0.753 ng gDNA

2x PCR Master mix Solution(i-MAX™ II)를 타사 동일 기능의 제품과 민감도를 비교 하기 위하여 λDNA template를 농도별 희석하여 20Kb fragment의 long PCR를 진행할 결과, 결과에서 볼 수 있듯이 타사 제품 대비 우수한 결과를 볼 수 있습니다.

A, 2x PCR Master mix Solution(i-MAX™ II); B, Competitor
Lane M, 1 Kb DNA Marker; lane N, Negative control; lane 1, 50 ng DNA; lane 2, 25 ng DNA, lane 3, 12.5 ng DNA, lane 4, 6.25 ng DNA, lane 5, 3.125 ng DNA; lane 6, 1.56 ng DNA; lane 7, 0.753 ng DNA