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LiliF 진단키트

Mycoplasma MDx

LiliF 진단키트 MDx Mycoplasma MDx

e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit (ver.2.0)

	Cat.No	용량	주문수량	판매가
	25235	48 tubes	up down	300,000원

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제품정보
TroubleShooting Guide
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PRODUCT INFORMATION

Description

49종의 mycoplasma 검출 가능한 Dried & aliquoted PreMix Kit

• 49종의 Mycoplasma 검출 가능
• 높은 특이도 및 민감도
- Hot-start Taq DNA Polymerase 이용
- 자사 분자진단 기술인 CLP 기술 적용하여 primer design
• 검사 유효성 검증 system 적용
- Internal Control 적용 : PCR 검사 오류 확인 장치
• 8-MOP 적용
- 증폭된 PCR product를 통한 교차오염 방지
• Dried & aliquoted PreMix, All-in-one 제품
   - 반응에 필요한 모든 시약이 tube 하나에 dried pellet 상태로 되어 있음
   - Template만 첨가하여 바로 PCR 수행
   - Gel loading dye가 포함되어 있어 바로 전기영동 가능
• 제품 안정성 및 재현성이 매우 우수함
- ALHP system에 의한 dried & aliquoted PreMix로 재현성 우수
- 진공압축제조공법에 의해 산화 및 수분방지로 안정성 우수

e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit(version 2.0)는 49종의 mycoplasma를 신속하고 정확하게 검출할 수 있는 제품입니다. Mycoplasma는 일상적인 cell culture 중 약 30~87% 정도의 contamination 되어 있는 것으로 밝혀져 있으며, mycoplasma의 contamination은 bacteria나 fungi와는 다르게 host cell의 형태적 변화를 일으키지 않으나 감염된 cell의 성장, 생존력, 그리고 DNA, RNA, protein의 합성과 같은 metabolism의 변화를 초래 할 수 있습니다. 따라서, 감염된 상태로 실험을 수행함으로써 믿을 수 없는 실험 결과를 야기 시키고 불안전한 생체물질을 만들어 냅니다. 이러한 심각성을 고려해 e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit(version 2.0)는 mycoplasma sp.에 특이적인 primer로 PCR을 이용하여 빠르고 효과적으로 test 할 수 있도록 고안하였습니다.

e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit(version 2.0)는 PCR 법을 기반으로 하여 자사 분자진단 기술인 CLP 기술을 적용하여 특이도 및 민감도가 높도록 primer를 설계하였습니다. 이와 더불어 Internal control을 적용하여 각각의 tube에 대해 false negative 반응 결과를 확인하게 하였으며 증폭된 PCR product를 통한 교차오염 방지를 위하여 8-methoxypsoralen(8-MOP)을 적용하였습니다. 8-MOP은 이중가닥으로 된 핵산 사이에 끼어 들어가는 물질로 알려져 있으며, 320~400nm 의
입사광선에 의해 광(光 )활성이 되면, 공유결합으로 이중 가닥 사이에서 교차결합을 형성합니다. e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit(version 2.0)는 hot-start PCR이 가능한 Taq DNA Polymerase를 포함하여 PCR 반응에 필요한 모든 구성요소(dNTP mixture, reaction buffer 등)가 ALHP system에 의해 각각의 PCR tube에 포함되어 dried pellet 상태로 되어 있기 때문에 실험자간의 pipetting에 오는 실험 오차를 현저히 줄일 수 있어 재현성이 매우 우수하며 진공압축제조공법에 의해 제품 내의 주요 구성 성분의 산화 및 수분방지로 인하여 활성 안정성이 매우 뛰어난 제품이라 할 수 있습니다. 또한, 본 제품은 template DNA 및 D.W만 첨가하여 PCR을 할 수 있고, Gel loading buffer가 들어가 있어 다른 어떠한 처리 없이 gel loading을 할 수 있는 매우 간편한 제품입니다.

Application

01Used for the Detection of Mycoplasma in cell culture

Kit Contents

Contents	25235
e-Myco™ Mycoplasma PCR Premix	48 tubes
DNase/RNase-free Water	1 ml
Control DNA	25 μl x 3T
Manual	1 ea

Technical Data

e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit(version 2.0) 의 Detection limit test

e-Myco™ Mycoplasma PCR Detection Kit(ver. 2.0)를 이용하여 각 사용 샘플별로의 detection limit를 관찰한 결과입니다. Template DNA를 이용하였을 경우, 3.25 pg/ml, cell number의 경우, 12 cells/ml 및 mycoplasma copy number로는 20 cfu까지 감도를 확인할 수 있음을 관찰 하였습니다.

TroubleShooting Guide

Q제품 사용 후 결과 문의드립니다. Detection 결과 중 positive control의 target band가 제품의 프로토콜과는 달리 너무 흐리고 약하게 나옵니다. 그리고, internal band 밑으로 다른 밴드가 한 줄 더 뜨는데 이건 왜 그런지요?: A당사의 제품을 사용해주셔서 감사합니다. Positive band는 internal control band와 같은 동일 primer 사용으로 인한 competition이 일어나는 현상으로 Template DNA 농도가 높으면 약하게 보일 수 있습니다.
Internal Band 밑으로 다른 밴드가 한 줄 더 생기는 것은 primer dimer로 보시면 됩니다.

QPCR 진행 시, total reaction volume은 어떻게 되나요?: A본 제품은 vacuum-dried premix type으로 초기 볼륨을 ‘0’으로 보시고, template 10㎕과 sterile water를 10㎕ 넣어
total volume을 20㎕로 맞추시면 됩니다.

Q실험결과를 보면 intenal band는 나타나는데 Sample band가 나타나지 않습니다.: ATemplate의 농도가 높을 경우 template가 PCR inhibitor로 작용할 수 있습니다. 그러므로 사용하는 template의 순도를 확인하시고,
농도를 낮추어 실험하신다면 더 좋은 결과를 얻으실 수 있습니다.

Q인트론의 Mycoplasma Detection Kit 테스트 횟수 및 사용방법을 알고 싶습니다.: A당사의 제품은 한 제품으로 48T/ 8T 가능하도록 제품이 판매되고 있으며, 자세한 매뉴얼은 당사 홈페이지 매뉴얼 검색을 이용하시면 아실 수 있습니다.