Description

병원성 Mycoplasma를 포함하여 8속 209종의 mycoplasma 검출 가능한 Dried & aliquoted PreMix Kit

• • Broad Species Detection
     - 병원성 Mycoplasma를 포함하여 8속 209종의 Mycoplasma 검출 가능
     - 현재 알려진 Mycoplasma의 99%에 해당
  
• • 높은 특이도 및 민감도
     - Hot-start Taq DNA Polymerase 이용
     - 자사 분자진단 기술인 CLP 기술 적용하여 primer design
  
• • Species Detection
     - 증폭된 PCR product에 대한 direct typing 가능
  
• • 검사 유효성 검증 system 적용
     - Internal Control 적용 : PCR 검사 오류 확인 장치
     - Sample Positive Control 적용 : 분석에 사용되는 template의 이상 유무 확인 장치
  
• • 8-MOP 적용
     - 증폭된 PCR product를 통한 교차오염 방지
  
• • Dried & aliquoted PreMix, All-in-one 제품
     - 반응에 필요한 모든 시약이 tube 하나에 dried pellet 상태로 되어 있음
     - Template만 첨가하여 바로 PCR 수행
     - Gel loading dye가 포함되어 있어 바로 전기영동 가능
  
• • 제품 안정성 및 재현성이 매우 우수함
     - ALHP system에 의한 dried & aliquoted PreMix로 재현성 우수
     - 진공압축제조공법에 의해 산화 및 수분방지로 안정성 우수

e-Myco™ plus Mycoplasma PCR Detection Kit는 병원성 Mycoplasma를 포함하여 8속 209종에 대한 mycoplasma를 검출할 수 있도록 고안된 제품입니다.
Mycoplasma는 배양세포나 배지 등의 오염균으로서 잘 알려져 있으며, Mycoplasma 오염 발생 빈도가 30~90% 이상을 나타내는 연구 결과가 있습니다.
Mycoplasma 오염은 세포의 증식속도를 저하시킴과 동시에 세포 기능에 심각한 변화를 초래할 수 있습니다. 예를 들면, apoptosis inducer에 대한 감수성 증가, nucleic acid synthesis의 저해, DNA transfection efficiency 변화, cell metabolism의 저해, DNA fragmentation, cell death 등이 있습니다. 따라서 세포배양에 기반을 둔 연구 수행에서나 생물학적 제제 등의 제품 생산에서는 반드시 Mycoplasma 오염이 조사되어야 하며 특히, 세포치료제, 백신 등의 생물학적 제제의 허가 시에는 Mycoplasma 부정시험이 반드시 요구됩니다. 현재 Mycoplasma 부정 시험에는 배양법(직접법)을 기본 시험법으로 사용하고 있으나 이를 위해서는 약 한달이라는 긴 시간이 요구되고 있어 매우 불편합니다. 생물학 제제 등의 제품 허가에서는 아직 관련 규정이 직접법을 규정하고 있어 불편함을 감수하고서라도 직접법을 사용해야 하지만 세포 배양을 이용한 실험에서까지 직접법을 적용하기에는 큰 불편함이 따르며 어떤 경우는 늦은 판정 결과 도출로 인하여 적용할 수 없기도 합니다. 따라서 세포 배양을 이용한 실험에서까지 직접법의 사용을 할 필요 없이 간편한 대체 방법이 활용하는 것이 바람직한 실정이며 그 방법이 최근 대두되고 있는 “PCR(중합효소연쇄반응)에 기반을 둔 Mycoplasma 오염 검사법”이라 할 수 있습니다. PCR에 기반을 둔 Mycoplasma 오염 검사법은 높은 민감도로 인하여 미량의 Mycoplasma 오염도 판정할 수 있으며 그것에 소요되는 시간도 매우 짧은 장점이 있습니다.

e-Myco™ plus Mycoplasma PCR Detection Kit는 PCR 법을 기반으로 하여 자사 분자진단 기술인 CLP 기술을 적용하여 특이도 및 민감도가 높도록 primer를
설계하였습니다. 이와 더불어 본 제품에는 검사 유효성 검증을 할 수 있는 system이 적용되어 있으며 첫 번째로 internal control은 각각의 tube에 대해 false negative 반응 결과를 확인하기 위해 첨가된 것이며, internal control은 primer set가 size에 의해 구별되는 internal control과 target DNA를 증폭하도록 제조되었습니다.
두 번째는 template DNA의 유효성을 확인해주는 sample control이 첨가되어 있어 분석에 사용되는 template의 이상 유무 확인을 쉽게 할 수 있도록 하였습니다.
또한, 증폭된 PCR product를 통한 교차오염 방지를 위하여 8-methoxypsoralen(8-MOP)을 적용하였습니다. 8-MOP은 이중가닥으로 된 핵산 사이에 끼어 들어가는 물질로 알려져 있으며, 320~400nm 의 입사광선에 의해 광(光 )활성이 되면, 공유결합으로 이중 가닥 사이에서 교차결합을 형성합니다.
e-Myco™ plus Mycoplasma PCR Detection Kit는 hot-start PCR이 가능한 Taq DNA Polymerase를 포함하여 PCR 반응에 필요한 모든 구성요소(dNTP mixture, reaction buffer 등)가 ALHP system에 의해 각각의 PCR tube에 포함되어 dried pellet 상태로 되어 있기 때문에 실험자간의 pipetting에 오는 실험 오차를 현저히 줄일 수 있어 재현성이 매우 우수하며 진공압축제조공법에 의해 제품 내의 주요 구성 성분의 산화 및 수분방지로 인하여 활성 안정성이 매우 뛰어난 제품이라 할 수 있습니다. 또한, 본 제품은 template DNA 및 D.W만 첨가하여 PCR을 할 수 있고, Gel loading buffer가 들어가 있어 다른 어떠한 처리 없이 gel loading을 할 수 있는 매우 간편한 제품입니다.

Application

• 01Used for the Detection of Mycoplasma in cell culture

Kit Contents

Technical Data

Sample control : a parameter of condition and concentration of template DNA
Target band : a parameter of mycoplamsa infection
Internal control : a parameter of PCR reaction of the detection kit

e-Myco™ plus Mycoplasma PCR Detection Kit 을 이용 하여 cell, recombination DNA실험 수행 결과 입니다. cell(Panel A) 경 우, 2x10⁵ ~ 12, recombination DNA(Panel B); 6.6x10⁵ ~ 20 copy 까지 감도를 확인 하였습니다.