Cell Culture
NO (Nitric Oxide) Plus Detection kit
PRODUCT INFORMATION
Description
Urine sample, Culture media, Plasma, serum, Tissue homogenate에서 NOS (Nitric Oxide synthesis)에 의해 생성되는
NO2-를 간접적으로 측정할 수 있는 제품
- • Diazotization assay(Griess method) 방법을 기초로 하여 변형/개발된 제품
- • 2종의 solution으로 구성되어 있으며 정확한 nitric oxide(NO)의 정량 측정에 적합한 제품
- • 충분한 Nitrite standard solution 제공으로 최소 13회 이상 control test 가능
NO (Nitric Oxide) Plus Detection Kit는 nitrite(NO2-)를 간접적으로 측정 가능한 제품입니다. Nitric oxide는 macrophage-mediated cytotoxicity의 effector molecules로 mitochondrial respiration이나 DNA synthesis 등을 저해하며, anti-tumor immune response를 저해하는 suppressive factor의 하나로 인식되고 있습니다. 본 제품은 Griess method 기반의 제품으로 L-arginine이 nitric oxide synthase(NOS)에 의해 citrulline으로 전변되면서 생성되는
nitrite (NO2-)가 sulfanilamide에 반응하여 diazonium염을 만들고, 이 생성물이 naphthylethylenediamine과 결합하여 colorimetric change가 일어나는 원리로 되어 있습니다.
2종의 solution mix를 통해 간편하게 NO를 정량 측정할 수 있는 제품입니다.
Applications
- 01Quantitative analysis of total nitric oxide
- 02Application to culture supernatant, Plasma, Serum, Saliva, Urine, etc.
- 03Research for cell cytotoxicity and immune response
Kit Contents
| Components |
≤ 1000 assay |
| N1 buffer (Sulfanilamide in the reaction buffer) |
50 ml |
| N2 buffer (Naphthylethylenediamine in the stabilizer buffer) |
50 ml |
| Nitrite (FW: 69.0) standard, 2 mM |
1 ml x 2 vial |
| Manual |
1 ea |
Technical Data
Schematic protocol and nitrite standard curve according to 9-serial 2-fold dilutions method.
Schematic protocol and nitrite standard curve according to 6-serial 2-fold dilutions method.
TroubleShooting Guide
- QNitric oxide (NO)를 direct로 측정할 수 있는 제품인가요?
- A본 제품은 Griess method 방법을 기초로 하여 개발된 제품입니다.
tric oxide의 생체 내 전변물질인 nitrite (NO2-) 를 간접적으로 측정함으로써 nitric oxide양을 측정하도록 고안 되었습니다.
- QCultured cell 샘플 이외에, Plasma나 serum의 경우 NO 측정은 어떻게 진행이 가능할까요?
- ACultured cell을 이용한 protocol과 동일합니다. 다만, 보다 효과적인 측정을 위해 PBS solution을 이용하여 sample을
1/2 ~ 1/10 정도 적합하게 희석을 진행 한 뒤, 0.22 µm filter로 filtering 진행하여 매뉴얼에 따라 assay에 적용하시면 됩니다.
- Q제품 설명과 매뉴얼을 보면 종합적인 NO 정량이 가능하다고 했는데 아질산염에 대한 정보만 안내되어 있습니다.
질산염도 정량이 가능할까요?
- A
Griess method 방법은 nitrite (NO2-)의 간접 측정법만이 가능하며, nitrate (NO3- )를 측정하기 위해서는 추가적으로 nitrite reductase를 이용하여 NO3- → NO2- 변환하는 과정을 필요로 합니다. 일반적으로 NO3- 는 체내로부터 배출되지만 생체 내 mechanism을 통해 NO2- 으로 전환되면서 세포에 반응을 일으켜 NO2- 가 생물학적 실험의 주요 측정 target이 됩니다.
실험의 목적에 따라 NO3- 의 정량 측정이 필요할 경우, nitrite reductase를 처리하여 적절한 농도 계산을 통해 결과값을 구하시길 권장합니다.
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