Real-time PCR
RealMOD™ Green W² 2x qPCR mix
PRODUCT INFORMATION
Description
SYBR Green type으로 구성되어 있으며, Real-time PCR을 손쉽게 수행할 수 있는 제품
- • 높은 특이도와 재현성의 보유한 제품
- • Low copy number의 타겟에도 효율이 뛰어남
- • 민감도가 뛰어나 primer dimer 등에 의한 신호 대비 잡음비(signal-to-noise)가 거의 없음
- • GC contents가 높은 template에서도 qPCR 결과가 우수함
RealMOD™ Green W2 2x qPCR mix는 cDNA 또는 gDNA를 이용한 quantitative PCR이 가능한 제품입니다. 본 제품은 Hot start 기능을 가지고 있어 dimer의
생성률이 낮으며 특이도와 재현성이 높은 것이 특징입니다.
특히 민감도가 뛰어나 primer dimer 등에 의한 신호 대비 잡음비(signal-to-noise)가 매우 낮은 것이 특징입니다. 또한 GC contents가 높은 template의 경우에도 실험 가능하며 low copy number의 target에서도 효율이 좋습니다. 본 제품은 2x type으로 제공되고 있습니다.
Applications
- 01Real-time PCR : Detection and quantification of DNA and cDNA targets
- 02Gene expression profiling : Gene knockdown verification
- 03Microbial detection : Viral load determination
- 04Array validation : SNP genotyping
Kit Contents
| Content |
Volumes |
| RealMOD™ Green W² 2x qPCR mix |
1 ml |
| Manual |
1 ea |
Wide Instruments Compatibility
RealMOD™ Green W² 2x qPCR mix는 standard qPCR이 가능하도록 되어 있습니다. 본 제품을 이용하여 실험 가능한 기기의 종류는 아래와 같습니다.
- • Applied BioSystems : QuantStudio™ 12K Flex, ViiA™ 7, 7900HT, 7500, 7700, StepOne™ & StepOnePlus™
- • Stratagene : MX3000P™, MX3005P™
- • Bio-Rad : CFX96™ & CFX384™, iQ™5 & MyiQ™, Chromo4™, Opticon®2 & MiniOpicon®
- • Qiagen : Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 6000
- • Eppendorf : Mastercycler® ep realplex2 & ep realplex4
- • Illumina : The Eco™
- • Roche : LightCycler®480
Technical Data
RealMOD™ Green W² 2x qPCR mix를 이용한 실험결과
- 동일한 sample을 사용하여 여러 반복수를 통한 실험 결과, dilution factor(1/10)에 적합한 Ct값이 관찰되었습니다.
- Melting curve 분석결과, 비특이 반응이 최소화 되었음을 확인할 수 있었습니다.
- 가장 basic한 Real-time 제품으로써, 준수한 성능을 나타냄.
TroubleShooting Guide
- Q실험결과, NC (negative control)에서 signal이 검출되었습니다.
- A외부로부터 오염이 됐을 가능성이 있습니다. Mixture 제작 시 오염에 유의하시기 바랍니다.
- QNon specific amplification 현상이 일어납니다.
- A여러 가지 원인 중 먼저 annealing 온도를 올려보실 것을 권장합니다. 또는 primer의 디자인이 잘 못 되어 amplify가 잘 일어나지 않았을 수 있으므로 primer의 디자인을 다시 해보시기 바랍니다.
- Q 실험결과, PCR product가 없거나 product signal이 약합니다. 어떻게 해야 하나요?
- A이 문제에 대한 원인은 여러 가지가 있을 수 있습니다. 첫 번째로 PCR product size가 길어 완벽한 PCR실험이 되지 않을 경우입니다.
이때는 PCR product의 크기를 줄여보십시오. 100 – 150bp 정도가 적합하며 최대 60 – 300bp를 벗어나면 실험에 영향을 줄 수 있습니다. 또한 annealing 온도가 영향을 줄 수 있는데, 가장 적합한 온도를 찾는 것이 중요합니다. 그 외 해결방법은 본 제품의 매뉴얼의 trouble shooting guide를 확인하시기 바랍니다.
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